人多能干细胞消化液 AC-1001008

人多能干细胞消化液 

产品基本信息 

产品名称 Applied Cell®人多能干细胞消化液 

货 号 AC-1001008 

规 格 100mL 

运输保存条件 2-8℃，冰袋运输 

使用范围 人多能干细胞(ES/iPS)消化后传代、冻存 

保质期 12个月 

产品简介 人多能干细胞消化液是埃泽思生物科技有限公司（Applied Cell®）*的一款不含蛋白消化酶、专业应用于人多能干细胞消化传代的产品。本产品为温和高效型消化液，较大限度减少对干细胞消化损伤，传代存活率高，且消化时间3-5min即可，和传统细胞传代方法相比，简化细胞传代过程。本产品生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。 

产品特性 温和高效，传代存活率高。 简化细胞传代过程，省去挑克隆的操作。

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操作方法（此次操作以6孔板为例） 1） 清洗：准备预传代细胞，贴边缓慢加入预热2 mL PBS缓冲液并轻轻晃动，然后沿培养皿边缘吸去PBS缓冲液。 2） 消化：在6孔板中加入2 mL消化液使之覆盖皿底，并置于CO2培养箱中孵育2~5 min； 注意：细胞密度不同，消化时间略有调整，在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克隆内部细胞间出现间隙，即刻吸掉消化液停止消化。 3）吹打：吸掉人多能干细胞消化液后，立刻加入平衡好的 2mL干细胞培养基，用移液器呈扇形吹打6孔板底，吹吸次数保持在3~5次，使皿底贴附的干细胞集落脱落，轻柔缓慢吹吸混匀，制成干细胞悬液，并将其转移到15mL离心管中； 注意：吹打细胞要轻柔，吹打次数在3~5次为宜，尽量避免形成单细胞。如有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落，需延长消化时间。 4）干细胞消化后，可以继续进行传代接种，也可以将干细胞进行冻存，步骤如下： 接种：1000 rpm/min离心3 min，弃上清，用室温平衡好的干细胞培养基缓吹打重悬细胞5-10次，并转移至包被好的培养板中，每孔2ml培养基。接种后显微镜下观察干细胞密度以及细胞团块大小，一般4个细胞以上的团块较合格，水平十字轻轻晃动6孔板，使细胞分布均匀。并置于CO2恒温培养箱培养，第2天观察细胞贴壁情况，每24h换液一次。 冻存：1000 rpm/min离心3 min，弃上清，加入2mL Serum-Free干细胞冻存液（AC-1001012），重悬3~5次后，将其加入到2mL冻存管中（注意：冻存液即用即拿，及时放回4℃冰箱。）。在冻存管上标记冻存细胞种类、时间、操作者及细胞批次，冻存管置于-80℃冰箱过夜，24h后将其转至于中进行长期保存。 质量控制 检验项目 Test Catagories 参考数据 Reference Data 结果 The results 外观 Physical APPearance 无色液体 Colorless liquid 符合规定 Conform to the provisions 澄清度 Clarity 澄清 Clear 符合规定 Conform to the provisions pH值 Ph value 6.9-7.3 符合规定 Conform to the provisions 渗透压 Osmolality 270-340 （mosm/KgH2O） 符合规定 Conform to the provisions 无菌 Sterility 无菌 Sterility 符合规定 Conform to the provisions 支原体 Mycoplasma 0.11um过滤，支原体试验为阴性 The mycoplasma test was negative after 0.11um filtration 符合规定 Conform to the provisions